Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.

Предыдущая Следующая

В качестве адсорбентов наиболее часто используют оксид алюминия или силикагель с величиной зерна от 65 до 200 мкм. Для успешного разделения смеси большое значение имеет равномерное наполнение хроматографической колонки. Безусловно, следует избегать пузырьков воздуха, неравномерной засыпки и в особенности трещин в адсорбенте. При заполнении колонки лучше всего приготовить суспензию тщательно высушенного адсорбента в растворителе, которым будет осуществляться элюирование, и эту суспензию медленно перенести (при постукивании) в хроматографическую колонку, в которую предварительно уже налито некоторое количество растворителя. Когда заполнение колонки окончено, адсорбент покрывают сверху крупным песком или ватой. Необходимо следить за тем, чтобы хро-матографическая колонка ни на секунду не оставалась «сухой» (без слоя растворителя над адсорбентом), так как в противном случае в слое адсорбента образуются трещины. Соотношение адсорбат : адсорбент должно составлять примерно 1 : 100.

Применяется также и сухое заполнение

колонок, при котором разделяемые вещест-

а в небольшом количестве растворителя

овместно  с  наполнителем   высушивают


досуха в вакуумном роторном испарителе. Затем эту пропитанную неподвижную фазу подают в колонку, заполненную сухим адсорбентом, и элюируют подходящими растворителями.

В качестве носителей жидких неподвижных фаз для распределительной хроматографии в разделительных колонках используют силикагель или порошок целлюлозы. Соотношение количеств анализируемых веществ и носителя лежит между 1 : 1000 до 1:3000.

При выборе подвижной фазы руководствуются соображениями, изложенными в разд. А,2.6 и А,2.7.

Разделяемое вещество вводят в колонку в виде максимально концентрированного раствора, причем для растворения используют возможно менее полярный растворитель с малой элюотропной силой, лучше всего подвижную фазу. Как только раствор почти пройдет, в колонку начинают добавлять тот же растворитель. Скорость движения раствора в колонке не должна быть слишком большой, чтобы достигалось адсорбционное равновесие (для колонки высотой 40 см это -3—4 мл/мин).

Если элюат стекает слишком медленно, в колонке несколько повышают давление. Для этого увеличивают столб жидкости над адсорбентом либо с помощью насосов, либо с помощью технических газов (сжатый воздух, азот, аргон) через склянки из дуранового стекла, проверенные на давление и закрытые винтом; это одновременно позволяет осуществлять дополнительное дозирование элюента.

В идеальном случае каждое индивидуальное вещество в результате разделения смеси находится внутри узкой зоны наполненной колонки. Если вещества окрашены или, например, видимы в УФ-свете благодаря флуоресценции, то можно осторожно вытолкнуть адсорбент с поглощенным веществом и разрезав его на отдельные зоны, экстрагировать вещества по отдельности из каждой зоны. Эта механическая обработка теперь мало употребима.

Предпочитают вымывать (элюировать) отдельные вещества из колонки дополнительным количеством растворителя и элюат собирать фракциями по -0,5—10 мл. Эта операция может быть автоматизирована с помощью сборника фракций, при которой падающие капли считают в приемнике электрически (фотоячейка) или используется объем фракций для регулировки. В собранных фракциях с помощью подходящего аналитического метода устанавливается, содержит ли она элюируемое вещество. Затем в случае твердых определяемых веществ фракции упаривают в вакууме и определяют температуру плавления остатка. Если использованный растворитель не элюирует вещество или после вымывания одного из веществ отделяются фракции с чистым растворителем, то надо поднять элюирующую способность растворителя. Для этого в увеличивающихся количествах — начиная с 1—2% — начинают использовать растворитель, стоящий выше в ряду элюирующей способности, и выясняют, элюируется ли теперь вещество из колонки. Это продолжают до тех пор, когда практически все введенные вещества будут элюированы.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы