Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.

Предыдущая Следующая

Были проведены также многочисленные работы, ставившие целью найти такие условия расщепления белка, при которых пептидные свя­зи распадались бы избирательно. В этом отношении самым многообе­щающим является ферментативный гидролиз. В распоряжении иссле­дователей имеется большой набор тротеолитических ферментов, гидро-лизующих пептидные связи избирательно.

Ферментативный гидролиз проходит в мягких условиях и не сопро­вождается вторичным распадом аминокислот. К числу недостатков этого метода можно отнести возможный вторичный синтез пептидов.

Наиболее специфичным из ферментов является трипсин. Он расщеп­ляет только пептидные связи, образованные карбоксилом аргинина и лизина. Его действие можно еще более ограничить, если динитрофени-лировать 8-аминную группу лизина. Химотрипсин расщепляет связи, образованные ароматическими аминокислотами. Недавно было обнару­жено, что он гидролизует и лейциновые пептиды. Менее специфичны папаин, пепсин и субтилизин. Последний позволяет, однако, получать смесь низкомолекулярных пептидов, что часто оказывается удобным при исследованиях.

Частичный гидролиз белка является самым несовершенным звеном в определении строения молекулы белка. Как уже отмечалось выше, кислотный гидролиз может привести к образованию вторичных про­дуктов распада, а ферментативный — вызвать вторичный синтез пепти­дов. Более совершенными были бы методы, позволяющие устанавливать строение белка без предварительного гидролиза. К таким методам от­носятся упомянутое выше последовательное отщепление аминокислот­ных остатков.

Н. И. Гаврилов предложил проводить электровосстановление белка. Им и Т. И. Орловой было показано на моделях, что пептидная связь восстанавливается только в том случае, если она образована проли-ном. Связанная с пролином аминокислота превращается в аминоспирт, который можно выделить после гидролиза остальной пептидной цепи.

1    1—CONHCH(R)—СО---

.. . NHCH(R)—CO—N

...NHCH(R)CH2OH + M_CONHCH(R)_c0...


В результате частичного гидролиза белка образуется сложная смесь пептидов. Она значительно сложнее, чем гндролизат, состоящий из одних   аминокислот,   как   по   количеству   возможного   числа   обломков,

Схема

фракционированного разделения смеси пептидов, полученных

из химотрипсиногена

Частичный  гидролнзат

Пятикамерный     электрофорез

\

\

\.

\

/ Основные пептиды

Нейтральные пептиды

Кислые пептиды


М|огокамерный электрофорез


Ионит Дауэкс-50


Окисление

нсо3н


 


Электрофорез на бумаге

I Хроматография на бумаге

\

\ \


\


I

Пятикамерный электрофорез


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы