Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Обращаем внимание: огнезащита деревянных конструкций в санкт петербурге от ООО Огнезащита

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.

Предыдущая Следующая

3.  Ферментативное расщепление пептида  с С-конца.

Для этого пользуются карбоксипептидазой, выделяемой из подже­лудочной железы крупного рогатого скота. Карбоксипептидаза рас­щепляет экзо-пептидную связь, образованную аминокислотным остат­ком со свободной карбоксильной группой.

карбоксипептидаза
. . . NHCH(R)CONHCH(R)CO-NHCH(R)CO-NHCH(R)COOH-------------------

. . . NHCH(R)CO-NHCH(R)CONHCH(R)COOH+NH2CH(R)COOH

Из всех методов определения С-концевых аминокислот этот метод самый специфичный. Пользуясь карбоксипептидазой также, как при действии аминопептидазой, можно определять не только С-концевую аминокислоту, но и последовательно отщеплять аминокислотные остат­ки с С-конца пептида. Реакция обрывается, когда в пептидной цепи встречается пролин, так как карбоксипептидаза не гидролизует связь CO—N.

513


Таким образом ферментативные методы дают возможность не толь­ко определять N и С-концевые аминокислоты, но и устанавливать по­рядок чередования аминокислотных остатков на N- и С-концах пеп­тидов.

Следующей задачей при определении строения пептидов является установление характера связи и последовательности аминокислотных остатков в молекуле пептида или белка. Эта задача, трудно выполни­мая в настоящее время для белков с большим молекулярным весом, облегчается тем, что в природе встречается значительное число отно­сительно низкомолекулярных соединений, представляющих собою пеп­тиды. Виланд предлагает различать три группы природных пептидов: олигопептиды, состоящие из 2—10 аминокислот, полипептиды, состоящие из 10—100 аминокислот, и макропептиды, к которым относятся соб­ственно белки. Изучение природных пептидов представляет собой важ­ный этап в подходе к изучению строения белка. Исследование обычно начинают с определения числа цепей, входящих в состав объекта изуче­ния. Для этого пользуются одним из ранее приведенных методов, на­пример динитрофенилированием, действием азотистой кислоты или аминопептидазы для определения N-концевой аминокислоты и восста­новлением, гидразинолизом или действием карбоксипептидазы для оп­ределения С-концевого остатка  (см. стр. 510 и далее).

Самый совершенный метод установления последовательности амино­кислот в пептиде заключался бы в постепенном отщеплении их от по­липептидной цепи, подобно тому, как синтез пептида проводят после­довательным нанизыванием аминокислотных остатков.

Для этой цели в настоящее время можно было бы воспользоваться методом Эдмана—последовательным отщеплением аминокислот в ви­де фенилтиогидантоинов (см. стр. 511). Широко применяют также кар-боксипептидазу и аминопептидазу.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы