Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.

Предыдущая Следующая

Пептид (или белок) обрабатывают 2,4-динитрофторбензолом в сла­бо щелочной среде (рН 9) при 20—25°. Образующиеся 2,4-динитрофе-нильные производные не распадаются  во время кислотного гидролиза

510


пептидов и белков (исключение составляют динитрофенильные произ­водные глицина, цистина, пролина и триптофана). Динитрофенильные производные аминокислот представляют собою кристаллические соеди­нения, окрашенные в желтый цвет. Вследствие оттягивания электронов динитрофенилированным бензольным кольцом они обладают ясно вы­раженными кислыми свойствами, легко разделяются электрофорезом и хроматографией и определяются спектрофотометрически.

Инграм предложил использовать для определения концевых амин-ных групп реакцию восстановительного метилирования по Бауману. При действии на пептиды формальдегидом и одновременном восста­новлении над палладием образуются N-диметильные производные пептидов,  гидролизующиеся  до диметиламинокислоты   и   аминокислот.

R-CH—CO—NH—CH(R')—CONHCH(R")CO . . . +H2/Pd-fHCOH---------------- >

I

NH»                                                                                                       н2о,н-
R-CH-CONHCH(R')-CONHCH(R")CO . . .----------- >

N(CH3)2

R-CH—COOH-fR CH—COOH . . .
I                       I

N(CH3)2                 NH2

Диметиламинокислоты не реагируют с нингидрином и их проявляют орцином, тимоловым синим и т. д.

Вследствие тенденции метильных групп к подаче электронов заряд на азоте диметиламинокислот несколько повышен, амфотерные свой­ства их выражены столь же ярко, как и у самих аминокислот. Разде­ление их методами электрофореза и хроматографией менее четко, чем разделение динитрофенильных производных аминокислот. Диметильные производные аминокислот не имеют широкого применения при иссле­дованиях строения  пептидов.

Метод ацилирования белков, широко применявшийся в начале сто­летия, сейчас потерял свое значение, так как большинство ацильных производных гидролизуются аналогично пептидной связи. Исключение составляет остаток n-иодбензолсульфокислоты (пипсил), который свя­зывается с аминогруппой прочнее, чем динитрофенильный остаток. .Обычно применяют пипсилхлорид, содержащий иод 135.

ji35_;/       ^>-SQ2Cl-j-NH2CH(R)CONHCH(R,)CO ...-------

_> jus—^       Ч>—SQ3NHCH(R)CONH—CH(R/)CO . . .

Пипсиламинокислоты можно отделить хроматографически, противоточ-ным распределением или определить, пользуясь радиохроматограммой. Пипсильную защиту полезно применять в тех случаях, когда N-конце-вым остатком являются глицин, цистин, пролин или триптофан.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы