Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.

Предыдущая Следующая

Разделение аминокислот на ионообменниках основано на способ­ности аминокислот образовывать соли с кислотами и щелочами. Под­бирая соответствующие катиониты или аниониты, можно быстро и с успехом разделить гидролизат белка, пользуясь для этого 2,5—3,5 мг белка. Ионообменную хроматографию хорошо сочетать с элюционным или вытеснительным анализом. Мур и Штейн пользуются для этого катионитной смолой сульфополистирольного типа Дауэкс-50, через колонку которого пропускают аминокислоты; последние вымывают затем соответствующими буферными растворами. Для разделения до­статочно 3 мг аминокислот.

Ионофоретический метод разделения аминокислот также базируется на их амфотерности. При различных рН раствора аминокислоты дви­жутся к катоду или аноду, в соответствии с их изоэлектрическими точ­ками и электро^форетической подвижностью Так при рН, близком к б, кислые аминокислоты направляются к аноду, основные к катоду, а нейтральные остаются неподвижными. Ионофорез также можно про­водить в растворе или на твердом носителе. Первый метод позволяет разделять аминокислоты только на сравнительно крупные фракции — кислую, основную и нейтральную. Второй метод, так же как и распре­делительная хроматография на бумаге, дает возможность разделять любые аминокислоты. В качестве твердого носителя применялись силикагель, крахмал и бумага. Из них самым простым оказался ионо-


31    Химия природных соединений


481


форез на бумаге. Все же при сложных смесях иногда оказывается целесообразным предварительно разделить исходную смесь на ряд фракций. Недостатком метода ионофореза являются процессы диф­фузии и электроэндосмоса, благодаря которым зоны разделения ока­зываются менее четкими. Применение высоковольтного ионофореза с напряжением на электродах от 1500 до 3000 в ускоряет процесс. Особенно широко используется он при разделении пептидов. В послед­нее время разделение проводят еще более тонко, сочетая одновременно распределительную хроматографию и ионофорез.

В некоторых случаях полезно бывает перевести аминокислоты в какие-либо производные, которые легче разделяются или легче затем определяются, например в динитрофенильные производные, окрашенные в желтый цвет, или производные, содержащие радиоактивный атом, чаще всего иод или серу.

Благодаря этим новым методам, разработанным очень детально, определение аминокислотного состава белка не является уже трудно­разрешимой проблемой.

Определение точного аминокислотного состава является первичным обязательным моментом при изучении строения молекулы белка. Без такого определения прежде всего оказалось бы невозможным установ­ление последовательности аминокислотных остатков в пептидной цепи. Помимо этого изучение аминокислотного состава белков позволяет сделать некоторые заключения о реакционной способности белковой мо­лекулы. В табл. 5 представлен аминокислотный состав ряда белков. В графе А указано содержание аминокислот в %, в графе В — в грамм-молях на 105 г белка. Такой подсчет позволяет сопоставлять аминокис­лотный состав различных белков. В зависимости от содержания в бел­ках аминокислот с различными функциональными группами (кроме а-СООН и C-NH2), в них могут преобладать кислые или основные, по­лярные или липотропные группы.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы