Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Основные разновидности и свойства крепежей для труб.

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.

Предыдущая Следующая

В 1958 г. Хорана предложил для последовательной деструкции 'поли-дезоксирибонуклеотидов использовать избирательный ферментативный гидролиз. Были найдены два специфических фермента, которые избира­тельно расщепляли 3'-5'-связь дизамещенного эфира по месту связи Сс3)—О или Ссз)—C'cs) — О. Фосфодиэстераза селезенки расщепляла эту связь по месту С(5)—О, оставляя С'(3) -фосфат, диэстераза змеиного яда — связь С'(3) —О, оставляя C'(s)-фосфат. Так как в полимерной цепи ДНК или соответствующего олигонуклеотида с одного края всегда находится нуклеотид со свободной С'(3)-гидроксильной группой, а с другой сторо­ны цепь заканчивается нуклеотидом со свободным С/(Г)-гидроксилом, то, очевидно, можно, действуя тем или иным ферментом, последовательно разрушать цепь с одного из ее концов, идентифицируя отщепляющиеся мононуклеотиды с помощью бумажной хроматографии.



СН20


диэстераза змеиного  яда

Этот прием кажется весьма удобным с практической точки зрения, хотя пока кратко сообщалось только об использовании его при изучении распада синтетического гомополимера — политимидиловой кислоты, и поэтому о его реальном значении трудно еще судить.

Как всегда при выяснении строения сложного органического соедине­ния, в том числе и специфического полимера, можно идти и синтети­ческим путем, т. е. получать соединения с заранее заданным строением, и, сравнивая их с веществами природного происхождения, (выносить суж­дение о строении последних. При определении строения полинуклеоти-дов речь должна идти о синтезе специфических олигонуклеотидов, т. е. таких, в которых имеется совершенно определенная заданная последова­тельность мононуклеотидных звеньев. Рассмотренный выше метод не­специфической полимеризации мононуклеотидов (стр. 251) для этой цели непригоден, так как необходимо иметь метод, который позволил бы создать цепь постепенно, наращивая мононуклеотидные звенья в нужном порядке.

Эти задачи сводятся в сущности к последовательному фосфорилиро-ванию «уклеозидов, причем фосфорилирующим агентом должен служить нуклеотид, 'который тем самым займет соседнее место в создающейся полинуклеотидной цепи. Поскольку методы фосфорилирования в настоя­щее время развиты достаточно хорошо, то главной задачей при разра­ботке методов  синтеза  полинуклеотидов является осуществление изби-

* В I960 г. Тоддом найдена реакция, которая может оказаться полезной для после­довательной деструкции ДНК. Каталитическим окислением СН2ОН-группы дезоксину-клеотнда получается кислота, в которой СООН-группа находится в (5-положении к фос-форноэфирной связи, вследствие чего последняя может избирательно расщепляться.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы