Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.

Предыдущая Следующая

Другой подход к решению задачи об установлении последователь­ности мономеров в НК связан с развитием методов последовательного отщепления мономеров с одного из концов полимерной цепи. Хотя трудно представить, чтобы этим путем можно было осуществить деструк­цию полимера, содержащего тысячу и более мономерных единиц, что имеет место в природных НК, однако значение этого пути несомненно хотя бы для установления строения олигонуклеотидов, получающихся при частичном разрыве полимерной цепи. В настоящее время известны подходы к решению этой задачи как для полирибонуклеотидов, так и для полидезоксирибонуклеотидов.

Тодд и Браун предложили для осуществления последовательного расщепления полимерной цепи РНК использовать следующий принцип. В РНК с одного конна цепи находится нуклеотид. имеющий свободные

252


гадроксилы у С (2> и С ^-атомов; терминальный нуклеозид другого конца цепи имеет фосфатную группу у С fsj-атома рибозного остатка. Гидро-ксильные группы у С (2) и С ^-атомов в этом последнем свободном и об­разуют а-гликольную систему, которая является единственной а-гли-кольной структурой во всей полимерной цепи. Если такой полимер (X) подвергать окислению йодной кислотой, то указанная а-гликольная груп­пировка терминального нуклеотида окислится в диальдегид (XI), а вся остальная цепь сохранится. В (XI) сложноэфирная фосфатная группа у C'(sj находится в (3-положении к альдегидной группе и потому должна очень легко элиминироваться с отщеплением (XII), как всякая спирто­вая группа или ее производное в (3-оксиальдегиде. Таким образом, мож­но, и это действительно удалось сделать, подобрать условия, в которых отщеплению подвергается только этот терминальный окисленный моно-нуклеотид, чем и достигается избирательность при его отщеплении.



-СН20^  /ОН


сн?он


ОН     у^СЩОН

о^Р^о-


о


/Он    ^--сн2о но-Jy

Вя-м


сн,он    но

о

,_Z\   о*р^о-/\
о
                       с

в,


-СН20^   /ОН

онс'   \    о^р


но-но

онс

в,

XII


онс онс


Далее в полученном новом полимере (XIII) можно, подвергнув его действию специфического фермента, отщепить обнаруживающуюся но­вую З'-фосфатную группу, не затрагивая всей полимерной цепи. При этом в следующем нуклеотиде снова обнажается а-гликольная группи­ровка и, повторив весь цикл, снова можно отщепить следующий «уклео-тид и т. д. Этот метод представляет несомненный интерес, хотя до сих пор он и не нашел серьезного применения в практике, что связано, скорее всего, с его относительной сложностью и многостадийностью.

253


Прием, предложенный Тоддом и Брауном для деструкции полирибо-нуклеотидов, естественно, непригоден для деструкции полидезоксирибо-нуклеотидов, так как последние не содержат а-гликольной группировки, хотя принципы, примененные в первом случае, могут быть использованы для деструкции цепи ДНК *.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы