Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.


В 1958—1959 гг. Майклсону удалось найти метод полимеризации мо нонуклеотидов, который приводит к получению полимеров, являющихся олигонуклеотидами со степенью полимеризации 5—20 и близко напоми­нающих природные олигонуклеотиды, получающиеся при частичном ги­дролизе природных РНК. Если циклические 2', З'-фосфаты нуклеотидов подвергать действию дифенилхлорфосфата и тетрафенилпирофосфата, то происходит быстрая полимеризация и образуются олигонуклеотиды. Можно избежать выделения циклического фосфата и подвергать дей­ствию одного из указанных конденсирующих средств непосредственно 2'- или З'-фосфаты нуклеозидов, которые вначале в этих условиях прев­ращаются в циклические фосфаты (см. стр. 227). Механизм полиме­ризации фосфатов может быть представлен следующим образом:



-7V-CH.0H
/   \        °

\     6Н50),РХ      II    /

О —------- ^->- р .

О

О

.С-

No

он


о

I/

> 

о

Ч


VII


сн2о-о


 



но


0   о

II/

— р но но


в

VIII


сн,о-

о


или


IX


-■я


Согласно этому предположению, циклический фосфат (V) вначале образует при действии конденсирующего средства смешанный ангидрид с дифенилфосфорной кислотой (VI), последний при фосфорилировании гидроксила, находящегося у С(5) другого нуклеотида, дает полимер, со­держащий группировку циклического фосфата (VII), которая далее разрывается, образуя полимер с 3'-5' (VIII), 2'-5' (IX) или смешанны­ми связями.

Полученные полимеры по своим свойствам напоминают природные олигонуклеотиды: под действием кислот и щелочей они распадаются с образованием смеси 2'- и З'-фосфатов нуклеозидов, под действием фер­мента змеиного яда дают 5'-фосфаты нуклеозидов. Однако их отноше­ние к панкреатической рибонуклеазе, избирательно расщепляющей только З'-фосфаты, отличает их от природных РНК- Этот фермент, как уже указывалось выше (стр. 249), полностью расщепляет природный полимер; синтетические полимеры, напротив, расщепляются лишь частично и разбиваются на олигонуклеотиды с меньшей степенью поли­меризации, уже не способные к расщеплению указанным ферментом, но подвергающиеся кислому и щелочному гидролизу. Этот результат вполне естествен и подтверждает, что в синтетическом полимере, в от­личие от природных РНК, наряду с 3'-5'-связью (VHI) имеется и 2'-5'-связь (IX), не расщепляющаяся панкреатической риГонуклеазой. Обра­зование последней происходит при раскрытии полимерного циклического фосфата (VII) наряду с полимером, характеризующимся 3'-5'-связью.

250


Присутствие 2'-5'-связи является главным принципиальным отличием синтетических полинуклеотидов от природных РНК, что, впрочем, мало сказывается   на их физических свойствах.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы