Оборудование для Вашей лаборатории

Наши партнеры:

Наши контакты:

тел./факс
(4812) 31-08-84,
(4812) 31-74-79,
(4812) 31-74-99.


Для выделения смеси 2'- и 3'- замещенных изомеров пиримидинового ряда часто используют кислотный гидролиз.

При ферментативном гидролизе РНК, происходящем под действием избирательных ферментов, рибонуклеаз образуются как 3'-, так и 5'-фосфаты. Последние получаются также при гидролизе нуклеиновых коферментов   (см. стр. 232).

Дезоксинуклеотиды (IV и V) с очень малым выходом могут быть по­лучены при гидролизе ДНК, причем при химическом гидролизе образуются б'-замещенные фосфаты и 3'-, 5'-дифосфаты, а при фермен­тативном гидролизе могут быть получены любые монофосфаты. Для получения пиримидиновых дезоксинуклеотидов можно пользоваться и ферментативным, и химическим гидролизом, для получения производ­ных пуринового ряда обычно только ферментативным.

Выделение индивидуальных нуклеотидов из гидролизатов нуклеино­вых кислот до недавнего прошлого представляло очень сложную зада­чу и требовало длительной кропотливой работы. Однако в настоящее время этот вопрос относительно просто решается применением хрома­тографии на ионообменных смолах, которая позволяет получать чистые индивидуальные нуклеотиды.

СТРОЕНИЕ  НУКЛЕОТИДОВ

Если считать, что строение нуклеозидов уже установлено, то для выяснения строения нуклеотидов необходимо решить лишь один вопрос — местонахождение остатка фосфорной кислоты в молекуле. Действительно, при выяснении строения любого нуклеотида прежде всего можно путем гидролиза перейти к соответствующему нуклеозиду и тем самым решить вопрос о структуре основной части молекулы или, в том случае, если налицо какой-либо новый нуклеозид, устанавли­вать далее его строение методами, разобранными в предыдущей главе. Что касается установления места остатка фосфорной кислоты, то это может быть выполнено с применением чисто химических или фермен­тативных методов.

Химические методы. Простейшим приемом, позволяющим различать 5'-фосфаты, с одной стороны, от 2'- и З'-фосфатов, с другой, является окисление йодной кислотой. В самом деле, совершенно ясно, что только в молекуле 5'-фосфатов содержится а-гликольная группи­ровка, способная к окислению, тогда как 2'- или З'-фосфаты такой груп­пировки не имеют и поэтому инертны к действию йодной кислоты.

ОН     ОН

/f—Hv                                         СН0 снО

4Apoch>o-^R                                   h2ospoch>o^r


ОРОэН2

носн.


НгОэРО       ОН

ОН     ОРО HOCHOO^   R


шо4

HJO«


ие окисляется

не окисляется


Однако в настоящее время однозначность этого метода подвергается сомнению. Кроме этого, наличие или отсутствие а-гликольной группи­ровки в молекуле может быть определено по способности к образова­нию комплексов с борной кислотой, что также используется иногда при установлении строения.


Предыдущая Следующая

Поиск по сайту

Литература

Доставка продукции:

ООО "Автотрейдинг"

Ж/Д перевозка (контейнера)

Собственный транспорт

Любая транспортная компания на Ваш выбор!

Последние материалы